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脉冲场电泳使用注意事項
發表日期:2012-06-29
 

安全:

1、CHEF 系统在运行中使用高电压和大电流,因此在仪器运行过程中,不能随意打开电泳槽。如果确实需要打开电泳槽,一定要在仪器暂停、“high voltage”指示燈熄滅後才可以打開。

2、脈沖場電泳過程中,緩沖液會循環流動,因此要檢查電泳槽和管道系統時候有漏液。

3、電泳結束後,等“high voltage”燈滅後,再依次關掉冷凝系統,主機開關,打開電泳槽,取出凝膠,進行染色等操作。

 

操作注意事項:

4、電泳槽水平的調節:用水平泡調節,確保電泳槽的水平,

5、灌膠框的放置:不同的凝膠使用不同的灌膠框,檢查灌膠框的位置,使之處在電泳槽的中央。

6、梳子的放置:梳子不要和灌膠框密切接觸,保持1-2毫米的距離;

7、灌膠:灌膠前用水平泡調節灌膠框的水平;加熱好的瓊脂糖溶液,不要立刻倒膠,待稍許冷卻後,約40℃左右,再倒膠。倒膠過程中如果有氣泡,用tip頭將氣泡戳破即可。

8、修膠:制備好的凝膠,在從灌膠架取下後,要用手術刀片,對凝膠進行修飾,把多余的凝膠刮去。

9、凝膠的放置:點樣孔的位置應靠近電泳槽的後側。

10、蠕動泵的流速:電泳過程中,控制好蠕動泵的流速,一般控制在50左右,以免速度太快,使膠在溶液中移動。

11、過濾條的使用:在電泳槽的前內側,放置過濾條,以放置遊離的凝膠碎片進入冷卻泵,堵塞管道系統。

12、冷卻泵的開啓:冷卻泵開啓時,一定要把蠕動泵打開,以避免冷卻泵管道內的溶液因爲過度制冷,凝結成冰塊而堵塞管道。

13、電泳結束後,應及時取出凝膠,進行染色等操作,以避免因爲時間太長,而造成條帶的彌散。

 

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