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CFX96 实时荧光定量PCR仪操作流程及注意事項
發表日期:2012-06-29
 開始運行儀器

打開電腦

打開定量PCR儀底座開關

启动CFX Manager软件

 放置樣品

將PCR反應體系加入到0.2ml低緣八聯管,蓋上管蓋;或加入低緣96孔板,用光學級封膜封好。注意,必須帶一次性塑料手套,不要讓手指接觸到反應管表面。將反應管按順序放入儀器的加熱孔中。  

 設置程序,運行實驗

定量PCR软件操作基本步骤为:a. 设置热循环程序文件(Protocol Tab)   b.设置反应板文件(Plate Tab)。 C.点击“Start Run”键,运行程序热循环程序文件(Protocol Tab)设置指南:点击Edit(编辑)或 Create New(创建新程序)。

反应板设置文件(Plate Tab)设置指南:选择本次实验所要使用的荧光染料种类;单击样品类型;如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品(Standard),点击“Dilution Series”键可设置其标准品浓度及稀释倍数。

点击“Start Run”键。单击open lid(打开热盖)或Close lid(关闭热盖)放置样品;单击Start Run,保存文件,开始运行程序。

 結果分析

PCR反應結束後,軟件會自動計算標准曲線和Ct值等。

如需进行表达量分析、等位基因分析等, 在软件窗口选择相应分析功能。

點擊右上方的“Report”鍵,還可輸出結果報告單

 

 關閉運行儀器

实验结束后取出反应管,顺序关闭CFX Manager软件、定量PCR仪电源,关闭电脑。注意!CFX仪器上盖部分为全自动控制,在通电状态,严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为,此类行为会导致上盖故障,危及仪器使用。

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