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CFX Manager软件反应板快速指南
發表日期:2012-06-29
 实验反应板设置图 1显示实验设置窗口中一个预览的反应板设置。点击 Create New打開反應板編輯器創建一個新的反應板。點擊 Select Existing通过浏览器上载一个反应板文件以在实验中使用或对其进行编辑。使用 Express Load下拉菜单直接上载一个反应板文件以在实验中使用或对其进行编辑。点击 Edit Selected打開反應板編輯器來編輯所選反應板的孔的內容。點擊 Start Run用當前上載的反應板開始運行實驗。

反应板编辑器反应板编辑器可用来创建一个新的反应板或编辑一个已经存在的反应板,图 2。

1.使用反应板编辑器工具栏 Scan Mode下拉菜单来指定试验中数据的获取方式。

2.點擊 Select Fluorophores選擇在實驗中將使用的熒光。

3.在反應板圖表中,選擇上樣的孔。

4.从下拉菜单中选择 Sample Type。

5.點擊適當的檢查框來上載選定孔的熒光。

6.对每个荧光输入 Target Name(基因表达分析时需要)并点击 Enter,或从下拉菜单中选择。

7.输入 Sample Name(基因表达分析时需要)并点击 Enter,或从下拉菜单中选择。

8.如果進行基因表達分析,點擊 Experiment Settings來指定參照靶標和對照樣品。

输入复孔次数指定一系列的复孔,可以通过高亮突出相应的孔并输入或在反应板编辑器的 Replicate#框中选择相应的复制数目,图 3。另一种方法是通过对一些孔的子集指定复制数:

1.在反應板圖表中選擇需要設置的孔,點擊 Replicate Series,打开 Replicate Series编辑创窗口,图 3。

2.输入 Replicate Group Size和 Starting Replicate#。

3.選擇反應板是水平還是垂直的進行上樣。

4.點擊 Apply確定複制數目。

 

創建一個標准曲線

输入一个标准品的起始靶标浓度,选择上样孔的 Sampe Type/Standard,在反应板编辑控制窗口 Concentration中输入数值,图 4,指定 All或特定的荧光素,并点击 Load檢查窗。另一種方法是輸入整個標准曲線梯度的濃度:

 

1.選擇已經被指定複制數目的孔並點擊 Dilution Series,打开稀释梯度窗口,图 4。

2.输入梯度稀释的 Starting Concentration。

3.輸入稀釋梯度中最初和最後的複制數。

4.输入 Dilution Factor并选择稀释是增加还是降低(即在第 2步中输入的值是最低还是最高浓度)。

5.點擊 Apply運行稀釋梯度。

創建孔的組別創建孔的組別來進行獨立分析。

1.點擊反應板編輯工具欄中的 Well Groups,打开 Well Groups Manager窗口,图 5。

 

2.點擊 Add,創建一個新的組別。

3.在反應板圖表中,選擇將要組成一組的孔。

4.點擊 OK返回反應板編輯器窗口。

 

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