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Trans-Blot SD半干转印槽使用安装指南
發表日期:2012-06-28
 

半幹轉印槽用于快速高效的蛋白和核酸的轉印。

1.准備好轉印緩沖液(參看說明書,不同樣品緩沖配方不同),把凝膠在緩沖中平衡20-60分鍾

2.剪好合適尺寸的轉印膜,在緩沖中浸5-10分鍾

3.剪好合適尺寸的濾紙(2張增厚濾紙或4張厚濾紙或6張薄濾紙)用緩沖液浸濕

4.在陽極平板上根據圖中順序做好轉印三明治,注意不能有氣泡

5.裝好陰極平板,合上安全蓋

6.接上合適的電泳儀開始轉印。注意電極連接(正對正,負對負)

根據不同的蛋白摸索最合適的轉印條件。常規推薦

小胶用10 V 30 minutes 或15 V 15 minutes.

大胶用25 V 30 minutes 或15 V 60 minutes.

注意大胶不要超过 25 V电压和 3 mA/cm2电流 ,小胶电流不要超过 5.5 mA/cm2

7. 关闭电泳仪,打开安全盖和阴极电极,取出转印膜

注:對于一些用酸性緩沖液的轉印,需把凝膠放在膜上,其他同上

 

常見緩沖液配方:

Towbin 缓冲(SDS蛋白,硝酸纤维素膜,Zeta-Probe膜):25mM Tris,192mM Glycine(20%methanol), pH8.3 ; DNA转印缓冲(Zeta-Probe膜):0.5xTBE

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